超微量分光光度計的新選擇

超微量分光光度計的新選擇

摘要： 無需比色皿或毛細(xì)管等耗材，只要1ul樣品即可檢測核酸濃度和純度，細(xì)胞濁度，蛋白A280，BCA，Bradford檢測，熒光檢測，最近有哪些新選擇？ 水分測定儀| 濁度計| 色度計| 粘度計| 折射計| 滴定儀| 密度計| 熱流計| 濃度計| 折射儀| 采樣儀| 

    檢測核酸或者蛋白樣品濃度是最常用的實驗操縱之一，傳統(tǒng)比色皿體積大，需要稀釋較多樣品，造成珍貴的核酸蛋白樣品浪費(fèi)，而且還要反復(fù)清洗比色皿，甚煩。好在有超微量分光光度計的出現(xiàn)。早在2004年生物通就已經(jīng)大力推薦過基因有限公司引進(jìn)的NanoDrop微量分光光度計，這種技術(shù)利用微量液體張力牽引形成光通路，從而替換比色皿，極具創(chuàng)新性和實用性，并得到2004年年度產(chǎn)品儀器類的創(chuàng)新大獎。這種首創(chuàng)無需比色皿稀釋，只要1ul樣品溶液即可直接檢測核酸/蛋白/或者細(xì)胞濃度的新型分光光度計很快在國內(nèi)科研用戶中得到非常熱烈的認(rèn)同。

并非僅僅是個概念。Nanodrop ND-1000的高吸收光檢測能力相當(dāng)50倍于傳統(tǒng)分光光度計，使得多數(shù)樣本不需要稀釋即可進(jìn)行全光譜（220nm-750nm）檢測，無需消耗品，即插即用無需預(yù)熱，操縱極為方便。可以進(jìn)行核酸定量和純度檢測，蛋白A280檢測，Bradford檢測，蛋白BCA檢測，細(xì)胞濁度檢測等多種紫外/可見光檢測。Nanodrop ND-1000令NanoDrop公司申明大振而迅速確立來其在超微量分光光度計市場的領(lǐng)導(dǎo)地位。

但是對于高通量實驗，不說384孔，就是96孔，這么一個一個的加樣-檢測-清潔下來，不累死也要頭暈眼花的。因此，順應(yīng)這種需求，NanoDrop公司又推出了NanoDrop ND-8000，可一次同時檢測1-8個樣本，使得檢測速度立即提升8倍----用8道排槍，只要6分鐘可以檢測96個樣品，而且體積非常緊湊----差未幾A4紙大�。�32x24cm）。設(shè)想看檢測96孔樣品的濃度----可以節(jié)省多少樣品，節(jié)省多少時間和清洗比色皿的精力阿！新技術(shù)真是令人喝彩！

Nanodrop延續(xù)這個設(shè)計理念到熒光信號檢測，推出了ND-3300熒光分光光度計。這個體積只有一本字典大小(20x14x12cm)的儀器卻擁有強(qiáng)大的功能----3組LED（UV365，藍(lán)光470和白光500-650）覆蓋400-750nm全光譜熒光分析，不需更換濾光片，不論是自行研發(fā)或市售熒光染劑都可使用，如 PicoGreen、RiboGreen、Hoechst、FITC、Cy3-Alexa555、Cy5-Alexa647, quantum dots等等。只要1.5-2ul樣本量，不需比色皿或者毛細(xì)管，無需稀釋樣品，檢測發(fā)射光峰值波長的熒光強(qiáng)度和±20nm相對熒光輸出，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線定量。熒光范圍可達(dá)10的5次方（0.1nmM-1000nM）,采用2048像素CCD檢測，內(nèi)置濾光片往除395nm以下光波干擾，由于使用三組LED冷光源代替?zhèn)鹘y(tǒng)高能耗光源，NanoDrop ND-3300能耗超低----只需要電腦的USB接口供電，根本無需外置電源！

NanoDrop ND-3300并不能完全替換傳統(tǒng)掃描熒光分光光度計，也不適合檢測濃度特別低的樣品，其檢測濃度下限是1pg/ul，不如酶標(biāo)儀和傳統(tǒng)熒光分光光度計。但是NanoDrop ND-3300能檢測樣品物質(zhì)量卻實在比酶標(biāo)儀和傳統(tǒng)熒光分光光度計小的多----以PicoGreen為例，ND-3300可以檢測少至2pg的DNA樣品（2ul，1ug/ul），酶標(biāo)儀/讀板機(jī)檢測下限50pgDNA樣品（濃度讀數(shù)下限以0.25pg/ul為例）；傳統(tǒng)分光光度計下限則是25pgDNA樣品(濃度讀數(shù)下限0.025pg/ul為例)。所以生物通特別提示你留意“檢測濃度”和“檢測物質(zhì)量”是不同的概念哦。

NanoDrop在快速超微量樣品吸收光/熒光檢測領(lǐng)域帶來的令人線人一新的變革，新技術(shù)可令每個研究職員直接感受到技術(shù)進(jìn)步的愉悅，好用是很好用，這3臺儀器價格不菲。2007年10月賽默飛世爾（Thermofisher）公布收購Nanodrop公司，并將其產(chǎn)品收回Thermofisher旗下。

現(xiàn)在我們又多了一個新選擇----GE Healthcare公司最新推出都NanoVue超微量分光光度計！這是一款非常輕易操縱的微量分光光度計，可以用來精確檢測核酸、蛋白和細(xì)菌培養(yǎng)液的濃度。只要0.5-5l的樣品加在一種全新設(shè)計的樣品板上檢測即可直接得到結(jié)果。由于全新的疏水點樣表面使得樣品檢測完之后還可以用Tips直接回收樣品，假如不需要當(dāng)然也可以簡單擦拭徹底清潔樣品板，減少樣品間交叉污染。檢測時間5秒之內(nèi)即可完成讀數(shù)、出峰識別和檢測峰確認(rèn)。檢測波長范圍200nm-1100nm。核酸掃描的可視化功能使得可以檢測樣品中雜質(zhì)的存在，對于RNA樣品測定非常有用。Press-to-Read功能使得按下檢測鍵后才打開光源檢測，減少光源工作時間延長光源使用壽命。整體光學(xué)結(jié)構(gòu)為固定化設(shè)計，避免搬動造成光路偏移。

NanoVue的設(shè)計上內(nèi)置了很多功能，方便使用者的工作----既然要簡化操縱，當(dāng)然是越方便越好！比如，儀器內(nèi)置寡核苷酸引物的分析方法，只要鍵進(jìn)66堿基以下的寡核苷酸序列即可計算獲得轉(zhuǎn)換因子（ug/ml），分子量理論吸光度（AU/umol）和理論Tm值。內(nèi)置多種蛋白定量檢測方法，包括Bradford, BCA, Lowry, Biuret和直接紫外法，最多可支持27個標(biāo)準(zhǔn)樣品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線并可以保存。此外，儀器可以自動測定所需光徑也可手動調(diào)教以滿足特殊要求�？梢詥吸c校正或者多點校正、自選波長測定目標(biāo)樣品濃度。大面積高分辨率液晶屏上可顯示所有結(jié)果，包括標(biāo)準(zhǔn)曲線波長掃描圖像，處處體現(xiàn)方便用戶的宗旨。